[討論] sample buffer於室溫下會變色

看板Biotech作者 (梅子)時間15年前 (2009/11/20 08:38), 編輯推噓8(8推 0噓 13→)
留言21則, 13人參與, 5年前最新討論串1/1
蛋白質的sample buffer 配置之後 以往是放在4度C保存 但是 有時後 拿出來時 會有沉澱的情況發生 應該是裡面所含的SDS 所造成的現象 所以~後來就放在室溫下了 結果 整瓶buffer的顏色 從原本的藍 褪色成 偏綠 之後又變成淺淺的褐色 可是~拿去跑膠 跑出來的bane 還蠻正常的 所以，很疑問 到底他顏色變掉 會不會造成什麼影響?? 那又是什麼導致變色(有聽過人家說 是pH值的關係??) 另外 SAMPLE BUFFER配方如下 ddH2O 4ml 0.5M Tris-HCl pH6.8 1ml glycerol 0.8ml 10%SDS 1.6ml B-me 0.4ml 0.05% Bromophenol blue 0.2ml -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.130.38.65
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11/20 10:10, , 1F
有顏色的是什麼成分？google一下不就知道了~??
11/20 10:10, 1F
推
11/20 11:41, , 2F
B-me吧 不加DTT或B-me的sample buffer都不會變色
11/20 11:41, 2F
推
11/20 12:48, , 3F
我家以前 2-ME 都是用前加。如此 sample buffer 可長放室溫
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11/20 13:39, , 4F
同樓上
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11/20 15:58, , 5F
我們家就算加了2-ME也是放室溫，之前實驗室是冰在-20會變
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11/20 15:59, , 6F
橘黃色，拿去煮一下就回到藍色了，老師說那是正常的
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11/20 16:16, , 7F
我們都有加B-me, 可是放在室溫都沒有變色
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11/20 16:18, , 8F
可是我們有加EDTA
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推
11/20 16:33, , 9F
beta-ME不是不穩定? 我放室溫久了臭味都不見了...
11/20 16:33, 9F
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11/20 17:37, , 10F
所以~顏色變化 不會影響就是囉?! 味道~放室溫還是一樣耶
11/20 17:37, 10F
推
11/20 17:48, , 11F
有顏色變化代表pH變了...
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11/20 17:49, , 12F
Bromophenol blue is an acid-base indicator
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推
11/20 23:00, , 13F
有加2-ME放室溫，但是無變色+1
11/20 23:00, 13F
推
11/21 16:52, , 14F
不同溫度Tris pH值不同 Bromophenol blue是酸鹼指示劑
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11/21 16:54, , 15F
buffer從4度到RT當然會變色 跟2-ME關係不大...
11/21 16:54, 15F
推
11/21 17:58, , 16F
pH值的關係，+1滴1M NaoH就好了，不過不加沒什麼差
11/21 17:58, 16F
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11/22 10:44, , 17F
恩 那pH值這樣變化 對於跑膠 sample影響 大嗎?
11/22 10:44, 17F
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11/24 23:39, , 18F
影響不大 因為電泳槽內的buffer遠遠超過sample 的量
11/24 23:39, 18F
推
12/09 00:09, , 19F
要看ph會不會影響2ME的還原力 若是DTT變色就沒用了
12/09 00:09, 19F
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11/11 01:51, , 20F
所以~顏色變化 不會影 https://muxiv.com
11/11 01:51, 20F
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01/03 17:03, 5年前 , 21F
我們都有加B-me, https://daxiv.com
01/03 17:03, 21F
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