[求救] 請問protein expression的a.a 片段大小
各位大大好,
小弟目前實驗遇到一個問題,就是用 E.coli 表現蛋白質是否蛋白質的大小不能太小?
我預計請廠商幫我合DNA template, 我在用pQE30帶到JM109裡。之後在轉到M15大量
表現。
現在的問題是我的東西只有16個a.a,如果template設計成48個nucleotide那表現出來
也只有16個a.a.,會不會無法expression?
我現在的想法是在每16個a.a 的nucleotide sequence中墊一個phenylalanine, 然後做
三重複---> 48-F-48-F-48, F代表phenylalanine的3個nucleotide。
這樣應該peptide大小不會太小,然後表現之後再用chymotrypsin切F的位置,就有很多
獨立的目標peptide了。
這個方法主要的問題是template會有很多個nucleotide, 合成template的價錢又是
$18*nucleotides+$350(purify/strand), 算起來一條要2996, 那豈不是template
就要幾十萬?
所以小弟小要請教各位大大是否16個mer的peptide就可以表現了,還是有更好的方法
來得到我的peptide? (p.s. 不考慮直接和成peptide不然我的論文就沒料了)
謝謝!
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.114.51.248
推
01/25 22:40, , 1F
01/25 22:40, 1F
推
01/25 23:26, , 2F
01/25 23:26, 2F
→
01/25 23:27, , 3F
01/25 23:27, 3F
推
01/25 23:36, , 4F
01/25 23:36, 4F