Re: [討論] 農桿菌生化檢測相關及水稻種子 RNA 純ꐠ…
一. 其實很難測不到耶.....農桿菌長的像鼻涕一樣...長的比 E-coli 慢很多
從外觀和生長速度就可以大概判定是不是農桿菌,你可以試試看不要分四區,
就不客氣的給他稍微畫多一點(比如說話一個愛心XD),養約48小時,
再倒入本氏液, 30min 後就會看到 plate 外圍有一圈黃色的沉澱物
二. 澱粉吸水膨脹...沒聽說過這種狀況耶....囧
還是換一個配方看看, 用 tris. SDS(20%). EDTA . DTT 複合的配方一樣可以
破種子,每個 lab 用的濃度都不一樣,可以再查查看吧
※ 引述《goldfish0909 (金魚)》之銘言：
: 各位版上的前輩們好
: 小弟我在實驗上遇到一些問題，想請教一下大家，問題敘述如下：
: 一、農桿菌生化檢測
: 挑取生長在 YEP (5 ppm rifampicin) EHA105 單一菌落，培養至 Lactose agar (
: 1% lactose, 0.1% Yeast extract, 2% agar)，以本氏液 (50 mM CuSO4.5H2O, 0.5M
: sodium citrate dihydrate, 0.9 M Na2CO3) 檢測。在 lactose agar 上分成四區劃
: 不同管 stock 菌液，每一區以 100 ul 本氏液染色，但在菌體周圍無看到黃色環帶
: 不曉得是哪裡出了問題? 還是哪位大大有照片提供給我參考一下
: 二、成熟水稻種子 RNA 純化
: 我是用 5 顆成熟種子以液態氮磨成粉末，加入 1 mL TRIzol 混合，再加入 200 ul
: 氯仿，以 13000 rpm 離心 15 分鐘，發現種子所含澱粉吸水膨脹，完全無上清液可
: 取用，請有經驗的大大們提供一下辦法，感激不盡~~
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 118.171.87.60
推
02/15 22:09, , 1F
02/15 22:09, 1F