[方法] 打破細菌萃取蛋白的方法?

看板Biotech作者 (^^)時間13年前 (2011/04/28 15:36), 編輯推噓3(3推 0噓 3→)
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最近開始要做大腸桿菌生產外源蛋白的試驗 以IPTG誘導後 目前所看到的試驗步驟 都是加入Lysis Buffer後 以超音波震碎儀 打破細菌 可是因為實驗室沒有震碎儀 有爬文看到yeast 可以用 glass beads打破 請問這個適於大腸桿菌嗎? 或者有其他方法可以用? 還是我可以加 Lysis buffer就好 麻煩大家解惑 謝謝 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 210.69.75.186
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你直接用urea就好了
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先用TNE，然後丟入液態氮裡面，反覆解凍三次
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破菌的方法很多,google很好找
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yeast是因為有細胞壁 所以才需要glass beads
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如果實驗室經費很夠 也推薦PIERCE的B-PER 挺好用的
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05/02 01:42, , 6F
理論上, lysis buffer就可以了, 之後需加DNase, 也可以加..
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