[求救] protein sample 原管加到reducing buffur

看板Biotech作者 (jacky)時間9年前 (2015/05/27 13:57), 編輯推噓4(4推 0噓 12→)
留言16則, 8人參與, 最新討論串1/1
各位大大好 事情是這樣的 早上把昨天assay好濃度的 protein 拿出來要配成相同濃度的western sample 但是就在水跟protein 取完後 最後就是加藍藍的那個reducing buffer各20ul 悲劇就發生了 我拿錯rank 不小心都加到protein原管那裏....... 該怎麼搶救才好? 重新assay嘛? 麻煩各位大大了!!! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 163.25.91.115 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1432706252.A.C4D.html
→
05/27 14:05, , 1F
"水跟protein取完後"...你的protein extract用水lyse嗎？
05/27 14:05, 1F
→
05/27 14:23, , 2F
不是耶 protein lyse完 才去測濃度阿
05/27 14:23, 2F
→
05/27 14:24, , 3F
加水只是稀釋 要配成同濃度的western sample
05/27 14:24, 3F
推
05/27 14:38, , 4F
1.重抽一管
05/27 14:38, 4F
→
05/27 14:39, , 5F
2.看加reducing bfr後總體積，再去換算比例
05/27 14:39, 5F
→
05/27 14:54, , 6F
如果只是要跑膠就再取啊 如果還有其他實驗就重來吧
05/27 14:54, 6F
→
05/28 00:32, , 7F
不用水lyse,卻覺得加水只是稀釋,那家sample buffer又不會
05/28 00:32, 7F
→
05/28 00:33, , 8F
有什麼困擾阿,對你而言,不也只是當作(加水)稀釋而已嗎
05/28 00:33, 8F
→
05/28 07:47, , 9F
加完reducing buffer 後還可以測濃度嗎？
05/28 07:47, 9F
→
05/28 10:17, , 10F
原po不是測完濃度後,才加水(或buffer)稀釋嗎？
05/28 10:17, 10F
→
05/28 10:52, , 11F
加完還可以assay 嘛? 我是先assay過了......
05/28 10:52, 11F
推
05/28 15:21, , 12F
一般是加1X lysis buffer稀釋怎麼會是用水@@
05/28 15:21, 12F
→
05/28 15:23, , 13F
而且你濃度都測完了，看你加了多少sample buffer進去原管
05/28 15:23, 13F
→
05/28 15:23, , 14F
換算一下就知道新的濃度啦
05/28 15:23, 14F
推
05/28 19:40, , 15F
沒辦法測濃度了 體積多20下去算新濃度
05/28 19:40, 15F
推
05/30 07:51, , 16F
哪ㄧ套kit
05/30 07:51, 16F
‣ 更多 jacky255257 的文章
文章代碼(AID): #1LPLpCnD (Biotech)