[求救] DNA跑膠

看板Biotech作者 (Sakicho)時間8年前 (2016/02/23 21:29), 編輯推噓0(009)
留言9則, 7人參與, 最新討論串1/1
最近抽dna跑pcr 產物跑膠結果都拖一長條 http://i.imgur.com/hkorbcc.jpg
同DNA Load 4.6.8.10.11.12 27F 長度20bp Tm50.8 GC:47.5% 1492 R 長度22bp Tm52.0 GC41.5% primer濃度 10uM PCR條件 95度10分鐘 95度1分鐘, 梯度(54-60)1分鐘, 72度1分鐘 循環34次 72度10分鐘延長 想問一下如果primer沒夾到會這樣嗎? 還是其實是DNA的問題 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 110.28.224.15 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1456234151.A.AEC.html

02/23 21:37, , 1F
沒P出東西
02/23 21:37, 1F

02/24 00:27, , 2F
DNA 加太多吧....
02/24 00:27, 2F

02/24 08:16, , 3F
同上 拖一條的是你input的gDNA下太多了
02/24 08:16, 3F

02/24 08:57, , 4F
我總體積20ul,DNA加1ul,所以我該降低dna 的量嗎?
02/24 08:57, 4F

02/24 09:09, , 5F
你的Tm最高也只有52度,梯度最起碼也要從50度開始拉吧
02/24 09:09, 5F

02/24 10:12, , 6F
dna 是要看重量加多少,體積會被你的濃度影響
02/24 10:12, 6F

02/24 12:11, , 7F
做分生實驗思維只停在體積,而沒有濃度觀念其實很危險阿
02/24 12:11, 7F

02/24 17:43, , 8F
DNA過濃可以稀釋後再取
02/24 17:43, 8F

02/24 18:51, , 9F
好,謝謝各位指教,dna濃度確實挺高的,我會再做調整
02/24 18:51, 9F
文章代碼(AID): #1Mp5wdhi (Biotech)