[求救] 請問如何把抗原從抗體上分離

看板Biotech作者 (s505015)時間5年前 (2018/11/05 17:03), 5年前編輯推噓4(4推 0噓 13→)
留言17則, 6人參與, 5年前最新討論串1/1
發問時請注意，若是要問實驗相關的問題，請將實驗的步驟、所用的條件大致列出 以方便板友幫您追蹤問題 若是求救事項涉及實驗室智慧財產(例如細胞細菌植株、質體載體等）之分讓， 請務必註明貴實驗室願意設立 正式合作或 簽署材料分讓協議(MTA)，否則版工將逕行刪 除 ----請將上列注意事項以 ctrl + k 刪除後開始編輯文章---- 大家好 請問一下如何把抗原從抗體上分離 因為抗原還要跑Elisa 有想到用edta 有沒有方向 謝謝 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.109.113.176 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1541408625.A.589.html
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11/05 17:46, 5年前 , 1F
這應該要看你的抗體是什麼形式的吧？
11/05 17:46, 1F
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11/05 17:47, 5年前 , 2F
呃，我的意思是，你用什麼方法純化你的抗原的？
11/05 17:47, 2F
實驗很簡單 就是把抗體丟到一個包有抗體的材料 然後再把抗原用下來 看這個材料復合物能抓多少抗原 ※ 編輯: s505015 (1.162.41.148), 11/05/2018 21:09:20
推
11/06 00:50, 5年前 , 3F
抗原抗體接合是共價鍵 應該往化學方法嘗試 我猜有點像Wes
11/06 00:50, 3F
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11/06 00:50, 5年前 , 4F
tern blot的stripping
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11/06 03:13, 5年前 , 5F
樓上的生化老師很火在你後面
11/06 03:13, 5F
推
11/06 04:14, 5年前 , 6F
抗原抗體是非共價鍵結，可以加酸抑制氫鍵以溶離
11/06 04:14, 6F
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11/06 04:51, 5年前 , 7F
抗原抗體的結合是凡德瓦、親水疏水力、氫鍵和電荷引力
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11/06 04:51, 5年前 , 8F
的組合，就是沒有共價鍵XD
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11/06 04:51, 5年前 , 9F
用強酸理論上能讓抗原掉下來，但是如果你的抗體和材料
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11/06 04:51, 5年前 , 10F
不是共價鍵接上去的話，抗體也有可能會掉，我顧慮的是
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11/06 04:51, 5年前 , 11F
抗體會掉的話會不會影響你後面的實驗。
11/06 04:51, 11F
其實我覺得可能會有一點 因為接下來收下的抗原是用elisa來跑 怕有麻煩 ※ 編輯: s505015 (1.162.41.148), 11/06/2018 07:45:39
推
11/06 09:02, 5年前 , 12F
酸洗下來趕快置換回中性buffer 基本上抗原抗體都還能
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11/06 09:02, 5年前 , 13F
用 只是多少酸都會denature 不過抗原denature 應該比
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11/06 09:02, 5年前 , 14F
較沒關係除非你抗體設計的epitope 目標是在native時跟
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11/06 09:02, 5年前 , 15F
結構有關的區域
11/06 09:02, 15F
推
11/06 09:04, 5年前 , 16F
另外如果真的怕抗體殘留 就crosslink 到材料上吧
11/06 09:04, 16F
謝謝大家 ※ 編輯: s505015 (223.136.109.27), 11/06/2018 10:42:15
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11/08 20:43, 5年前 , 17F
試試veriblot
11/08 20:43, 17F
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