Re: [問題] 關於細菌繼代培養
※ 引述《linzhengzhan (研究所：碩士班vs博士班)》之銘言：
: ※ 引述《ici (南飛的意義)》之銘言：
: : 問題一
: : 若是第一次養 plate上只有長一些些
: : 可以在flow裡面 用loop直接將第一次長的菌拉開後 再送回incubator嗎?
: 視情況而定，如果已放超過16hr的話，不建議這樣作，因為怕菌在長時間培養會有問題，
: 也怕已長出的菌會太老，使活性降低……；如果放的時間不足16hr的話，就繼續養吧……
: 建議：
: 把少量的菌，先種至broth放大，再劃plate存下來；E. coli在LB plate上只有
: 一個月的保存期限，每一個月要劃一次菌……
: : 問題二
: : 若菌沒有長 這個plate可以再使用嗎? (接種同一菌株)
: 不可以，怕會汙染到之後要種的菌，所以最要是換一片plate，以確保安全……
: : 問題三
: : 4度C冷藏保存是為了pause cell cycle
: : 那冷藏過的plate(或裝有medium 的tube) 可以再送回incubator繼續培養嗎?
: 在以前，有將plate放到4℃後，再拿出來養，是可以的，但是限少數情況，理由同問題一
: ；而裝有medium的tube也是ok，但不要超過一天，因為菌的活性會降的很低，也限少數
: 情況……
若冰過再拿出來養, 生長的速度一定會變慢,
但是沒辦法掌握他到底變得多慢,
若是在還沒完全恢復活性的時候, 就做實驗,
結果可能會非常怪異;
而且也不知道在冷藏的過程中,
會不會影響到菌的生理或什麼的...
如果因為短時間不做而冷藏起來,
以前我們實驗室會要求,
拿出來後先接到裝 medium 的 tube 裡養一天,
再接到另一支 tube 裡, 再養一天,
一定要接兩次, 觀察其生長回復正常之後,
才能開始做實驗.
我曾經偷懶只接一次就做實驗,
可能是活性真的沒有恢復, 結果非常怪異,
感覺菌就是長不起來的樣子,
個人建議不要在這個地方偷工減料...
對了, 我以前做的菌是 Deinococcus.
: : 這些問題看起來好像很笨>"<
: : 真不好意思
: : 因為我找不到答案 又很想知道這些方法可不可行
: : 麻煩瞭解的人幫我回答一下
: : 或是提供網址or書籍供我參考
: : 非常感謝<(_ _)>
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CH2一CH2一CH一COO-
| | Methionine (Met)
S一CH3 +NH3
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◆ From: 61.230.104.77
推
10/16 20:55, , 1F
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