Re: [問題] 關於northern的問題
※ 引述《kirby0415 ()》之銘言:
: 嗯 對~gel是用formamide做的
: 我EtBr是等到transfer完,把壓的扁扁的膠拿去外染
: 是有看到一些尚未transfer過去的sample
: 但應該佔當初loading sample的極少量
: 而我拿membrane去UV box
: 以254nm的UV去crosslink 5分鐘
: 從box上方的玻璃可看進去我的membrane
: 是可以看到membrane上有黑黑的
: 所以想再請問一下 這樣是否就是我的sample有上去呢?
: 謝謝囉!
以前我做northern時,
transfer完是到暗暗的地方..
用手提UV燈照(印象中也是254nm)
看看有沒有18S, 28S rRNA
(我的sample是真核細胞total RNA,所以可以看到18S跟28S rRNA)
可以大概看一下loading是否一致,
還可以label 18S,28S rRNA位置當作一個marker
我想,您用UV box也是一樣的
您看到membrane上黑黑的,是否長得很像band?
是否一個一個排在您loading的well下?
若是的話應該就ok了
提供您做參考~
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◆ From: 61.217.213.7
推
08/12 17:42, , 1F
08/12 17:42, 1F
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