[求救] RIPA buffer

看板Biotech作者 (我不要現在就出征....)時間15年前 (2009/03/11 11:42), 編輯推噓7(7推 0噓 10→)
留言17則, 6人參與, 5年前最新討論串1/2 (看更多)
請問各位大大 有人用過RIPA 來裂解過組織來抽蛋白嗎?? western blot一直做不出來 跟本不知道什麼問題 從源頭找 想問RIPA是可以用來抽組織的蛋白 還是只能抽CELL內的蛋白呢?? 謝謝各位大大 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 203.71.94.5
推
03/11 12:15, , 1F
可以 ripa+sample->均質sample->on ice 數分鐘
03/11 12:15, 1F
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03/11 12:17, , 2F
而且你做protein定量有出來嗎!? 沒出來WB也免做了 冏
03/11 12:17, 2F
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03/11 12:17, , 3F
有興趣可以看看abcam的WB protocol
03/11 12:17, 3F
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03/11 12:47, , 4F
有定量出來 只是跑出來的蛋白質都很醜 我在前面有留言
03/11 12:47, 4F
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03/11 12:47, , 5F
有我跑WESTERN得圖 一整個都很怪 找不出原因說
03/11 12:47, 5F
推
03/11 12:53, , 6F
你把上膠拉長點 你樣品的蛋白質濃度很濃嗎!?
03/11 12:53, 6F
推
03/11 12:56, , 7F
還有跑的時候V小點 不知道有沒有改善... 冏
03/11 12:56, 7F
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03/11 13:53, , 8F
我的蛋白質濃度約在50microG上下 我的V分三個段落跑
03/11 13:53, 8F
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03/11 13:53, , 9F
分別為80-20MIN 90-1hrs 100-跑到最後
03/11 13:53, 9F
推
03/11 13:56, , 10F
跑的時候多跑一組細胞的試試看就知道了
03/11 13:56, 10F
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03/11 13:56, , 11F
看是sample本身的問題還是WB的問題
03/11 13:56, 11F
推
03/11 17:09, , 12F
趁機問一下什麼是"做蛋白定量有出來"
03/11 17:09, 12F
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03/11 17:09, , 13F
吸光值多少或是濃度多少以上才算有出來???是這意思嘛?
03/11 17:09, 13F
推
03/11 17:22, , 14F
OD介於你標準曲線0~最低濃度BSA點間 濃度就太低了
03/11 17:22, 14F
推
03/12 00:22, , 15F
我有用ripa抽過組織和細胞做western blot ，都沒問題說
03/12 00:22, 15F
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11/11 01:20, , 16F
有我跑WESTERN得 https://daxiv.com
11/11 01:20, 16F
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01/03 16:52, 5年前 , 17F
OD介於你標準曲線0~ https://noxiv.com
01/03 16:52, 17F
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